Исследование влияния водорастворимой формы дигидрокверцетина при его введении per os на энергетический обмен в лимфоцитах крови крыс с экспериментальной кардиомиопатией

Резюме

Кардиомиопатии относятся к наиболее тяжелым патологиям миокарда, которые характеризуются резистентностью к терапии и высокой смертностью вследствие нарастающей сердечной недостаточности и аритмии. Патологические изменения в клетках миокарда при кардиомиопатиях связаны с дисфункцией митохондрий, приводящей к избыточному образованию активных форм кислорода и развитию окислительного стресса. В этой связи изучение терапевтического потенциала применения эффективных антиоксидантов при кардиомиопатиях, а также механизмов их действия на функционирование митохондрий актуально и представляет высокую практическую значимость.

Цель исследования - определить влияние перорального 14-дневного введения природного антиоксиданта дигидрокверцетина в водорастворимой форме (ДГК-ВФ) на активности ключевого маркера дыхания митохондрий сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и цитоплазматического маркера гликолиза лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в лимфоцитах крови, а также на уровень перекисного окисления липидов в сыворотке крови крыс в норме и при экспериментальной кардиомиопатии.

Материал и методы. Исследование проводили на половозрелых крысах-самцахлинии Вистар (масса тела 220-240 г). Для моделирования кардиомиопатии у животных применяли гидрохлорид изопреналина (двукратное подкожное введение в дозе 150 мг на 1 кг массы тела, с перерывом в 24 ч). ДГК-ВФ добавляли в питьевую воду в течение 14 сут в дозах 15 или 30 мг на 1 кг массы тела крыс. Активность СДГ и ЛДГ в лимфоцитах измеряли с помощью высокочувствительного цитобиохимического метода на мазке крови по восстановлению нитросинего тетразолия хлорида до темно-синего диформазана. Содержание малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови, митохондриях сердца и печени крыс определяли спектрофотометрическим методом с помощью тиобарбитуровой кислоты. Митохондрии выделяли из тканей крыс общепринятым методом дифференциального центрифугирования. Дыхание митохондрий регистрировали полярографическим методом.

Результаты. Экспериментальная кардиомиопатия у крыс сопровождалась увеличением содержания МДА в 2 раза в сыворотке крови, а также статистически значимым повышением активности СДГ и ЛДГ в лимфоцитах крови. Курсовое пероральное применение ДГК-ВФ при кардиомиопатии в дозе 15 мг на 1 кг массы тела крыс приводило к значительному снижению уровня МДА в сыворотке крови, но не изменяло активность СДГ и ЛДГ в лимфоцитах крови по сравнению с животными с кардиомиопатией, не получавшими ДГК-ВФ. В контрольной группе животных применение ДГК-ВФ в дозе 15 мг/кг достоверно увеличивало активность ЛДГ в лимфоцитах крови, но не оказывало статистически значимого влияния на активность СДГ, а также параметры митохондриального дыхания и окислительного фосфорилирования, уровень МДА в митохондриях сердца и печени. Увеличение вводимой дозы ДГК-ВФ до 30 мг/кг оказывало меньшее влияние на изменения указанных параметров у контрольных животных.

Заключение. Полученные данные показывают, что при экспериментальной кардиомиопатии у крыс курсовое применение ДГК-ВФ в дозе 15 мг на 1 кг массы тела оказывает антиоксидантное действие, препятствующее развитию перекисного окисления липидов в сыворотке крови, а у контрольных животных может модулировать энергетический обмен в сторону усиления гликолиза в лимфоцитах крови.

Ключевые слова:сукцинатдегидрогеназа, лактатдегидрогеназа, лимфоциты, митохондрии, перекисное окисление липидов, водорастворимая форма дигидрокверцетина, изопреналин-индуцированная кардиомиопатия

Финансирование. Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (грант № 20-015-00029A).

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Для цитирования: Хундерякова Н.В., Белослудцева Н.В., Хмиль Н.В., Мосенцов А.А., Степанов М.Р., Ананян М.А., Миронова ГД. Исследование влияния водорастворимой формы дигидрокверцетина при его введении per os на энергетический обмен в лимфоцитах крови крыс с экспериментальной кардиомиопатией // Вопросы питания. 2021. Т 90, № 6. С. 50-58. DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2021-90-6-50-58

В настоящее время установлено, что кардиомиопатии относятся к наиболее тяжелым патологиям миокарда, которые характеризуются резистентностью к проводимой терапии, а также высокой смертностью вследствие нарастающей сердечной недостаточности и аритмии [1, 2]. Основные изменения при кардиомиопатиях связаны с развитием в миокарде окислительного стресса. Считается, что митохондриальная дисфункция является одной из основных причин поражения миокарда при окислительном стрессе. Основными признаками нарушения функционирования митохондрий при кардиомиопатии считаются снижение активности комплексов дыхательной цепи и гиперпродукция активных форм кислорода [2]. Известно, что митохондрии являются основными источниками активных форм кислорода и при дисфункции этих органелл, как правило, применяют антиоксиданты, в частности дигидрокверцетин (ДГК) [3]. Недавние исследования показали, что ДГК в дозах 20 и 40 мг на 1 кг массы тела проявляет защитное действие у мышей с интоксикацией бензпиреном [4, 5]. В исследовании на беременных самках крыс репродуктивная токсичность фталатов купировалось при пероральном применении ДГК в дозах 10 и 20 мг на 1 кг массы тела [6]. ДГК препятствовал развитию окислительного стресса и диабетической катаракты у крыс с сахарным диабетом, вызванным стрептозотоцином, при пероральном введении в дозах 10, 25 и 50 мг на 1 кг массы тела в течение 60 дней.

Недавно в фармакологической практике было установлено, что ДГК в водорастворимой форме (ДГК-ВФ) оказывает антиоксидантное действие, превышающее таковое известных природных антиоксидантов, таких как витамин С, витамин Е и кверцетин [3, 7]. Данное вещество более активно по сравнению с обычно используемым ДГК, мало растворимым в воде, оно не накапливается в печени и после введения более длительно (до 7,5 ч) сохраняется в крови у крыс по сравнению с нерастворимой формой. После нескольких недель кормления старых мышей ДГК-ВФ наблюдалось восстановление активности митохондриальных ферментов до уровня активности, наблюдаемой у молодых животных [7].

Цитобиохимическое (ЦБХ) измерение в лимфоцитах крови активности ключевого фермента митохондрий сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и цитоплазматического маркера гликолиза лактатдегидрогеназы (ЛДГ), участвующей в распаде глюкозы до молочной кислоты в анаэробных условиях, отражает физиологическое состояние организма в норме и при патологиях [8-10]. Высокая чувствительность ЦБХ-метода достигается благодаря специальным условиям инкубации лимфоцитов, приближенным к внутриклеточным, что сохраняет нативную сетевую структуру митохондрий. При использовании ЦБХ-метода в экспериментальных и клинических исследованиях показана корреляция активности СДГ лимфоцитов крови с функциональным состоянием внутренних органов и тяжестью заболевания при миопатии и онкологических заболеваниях у людей и аутоиммунном артрите у крыс [11, 12].

В связи с вышесказанным изучение терапевтического потенциала ДГК-ВФ как эффективного природного антиоксиданта при кардиомиопатиях, сопровождающихся окислительным стрессом, а также исследование механизмов его действия на функционирование митохондрий в клетках крови и миокарда является актуальным и представляет высокую практическую значимость.

Цель исследования - определить влияние перорального 14-дневного введения ДГК-ВФ на активности ключевого маркера дыхания митохондрий СДГ и цитоплазматического маркера гликолиза ЛДГ в лимфоцитах крови, а также уровень перекисного окисления липидов (ПОЛ) в сыворотке крови крыс в норме и при экспериментальной кардиомиопатии.

Материал и методы

Содержание и рацион животных

В экспериментах использовали половозрелых крыс-самцов с массой тела 220-240 г аутбредной линии Ви-стар, содержащихся в стандартных условиях вивария ИТЭБ РАН. Животные получали сухой гранулированный комбикорм (ООО "Лабораторкорм", Россия) с содержанием белка 19%, жира - 5%, углеводов - 60%, клетчатки - 4%, золы - 9%, кальция - 1,9%, фосфора - 1,1% (295 ккал в 100 г) с добавлением 2% очищенного пищевого, съедобного природного мела и 0,1% пророщенного зерна овса и имели свободный доступ к воде.

В качестве источника ДГК-ВФ была использована биологически активная добавка к пище "Таксифолин аква" (свидетельство о государственной регистрации № RU.77.99.11.003.E.003036.07.18, ООО "Продвинутые технологии", РФ) с содержанием ДГК 3 мг/мл. Животные, рассаженные в индивидуальные клетки, получали по 10 мл свежеприготовленной смеси биологически активной добавки к пище и питьевой воды из расчета 15 или 30 мг ДГК-ВФ на 1 кг массы тела ежедневно (в ночное время) в течение 14 дней.

Предварительные эксперименты были проведены на контрольных животных с целью выбора оптимальной дозы ДГК-ВФ. Для этого крысы были разделены на 3 группы (по 5 животных в каждой): 1) контроль (интактные животные); 2) контроль + ДГК-ВФ, 15 мг - крыс ежедневно поили ДГК-ВФ в дозе 15 мг на 1 кг массы тела в течение 14 сут; 3) контроль + ДГК-ВФ, 30 мг - крыс ежедневно поили ДГК-ВФ в дозе 30 мг на 1 кг массы тела в течение 14 сут. Данные дозировки были выбраны с учетом более высокой (по сравнению с человеком) интенсивности метаболизма у крыс и соответствуют использованным в исследованиях, выполненных на сходных биологических моделях [4-6].

Исследования проводили в соответствии с Европейской конвенцией о защите позвоночных животных (Страсбург, 1986) и Хельсинкской Декларацией (2000), они были одобрены этической комиссией ИТЭБ РАН (протокол № 14/2020 от 17.02.2020).

Модель изопреналин-индуцированной кардиомиопатии у крыс

После проведения предварительных исследований на крысах контрольных групп в работе была воспроизведена модель кардиомиопатии у крыс с помощью гидрохлорида изопреналина (Sigma, США) [13]. Крысы были разделены на 4 группы (по 5 животных): 1) контроль (интактные животные); 2) контроль + ДГК-ВФ - крыс ежедневно поили ДГК в дозе 15 мг на 1 кг массы тела в течение 14 сут; 3) изопреналин-индуцированная кардиомиопатия (ИЗК) - животным подкожно вводили изопреналин, растворенный в физиологическом растворе, в дозе 150 мг на 1 кг массы тела, двукратно с перерывом в 24 ч; 3) ИЗК + ДГК-ВФ - животные получали 2 инъекции изопреналина по указанной схеме и добавку ДГК-ВФ в составе питьевой воды в дозе 15 мг на 1 кг массы тела в течение 14 сут, начиная со дня первой инъекции изопреналина. Крыс умерщвляли методом краниоцервикальной дислокации на следующий день после окончания курсового приема ДГК-ВФ.

Цитобиохимическое определение активности сукцинатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы в лимфоцитах на мазке крови

Суммарную оксигеназную активность митохондрий (СДГ) и гликолитическую в цитозоле (ЛДГ) в лимфоцитах периферической крови определяли разработанным нами ЦБХ-методом (патент № 2364868, Россия) по восстановлению нитросинего тетразолия гидрохлорида (НСТ) до темно-синего диформазана [8, 9]. Активность ферментов СДГ и ЛДГ определяли на разных мазках. Каждый мазок инкубировали в отдельной кювете с субстратом (янтарной или молочной кислотой). Для приготовления мазков использовали кровь без антикоагулянта, полученную при декапитации животных. Для стандартизации процесса приготовления мазков использовали автоматическое устройство V-Sampler (Vision, Германия). Полученные мазки крови подвергали фиксации ацетоном 60% (ос. ч., Химмед, Россия), забуференным 10 мМ HEPES (Sigma, США) (рН 5,2-5,5), в течение 30 с при комнатной температуре, после чего ополаскивали бидистиллированной водой и высушивали. Именно благодаря мягкой фиксации меняется проницаемость мембраны иммобилизованных клеток, через которую проникают субстраты и НАД. Таким образом, цитохимические и гистохимические методы позволяют выявить физиологические изменения активности окислительно-восстановительных ферментов. Фиксированные мазки инкубировали в водяном термостате в течение 1 ч при температуре 37 °С и небольшом перемешивании в среде инкубации, содержащей 125 мМ KCl, 10 мМ HEPES, 1,22 мМ НСТ (Dudley Chemical Corporation, США), рН 7,2±0,05. Среда инкубации была дополнена 5 мМ молочной кислотой, 5 мМ малоновой кислотой (МАЛ) и 0,5 мМ НАД в случае определения активности ЛДГ или 5мМ янтарной кислотой для определения активности СДГ При ЦБХ-исследованиях показано уменьшение восстановления НСТ на эндогенных субстратах при добавлении избирательного ингибитора СДГ (МАЛ), поэтому в пробу для определения активности ЛДГ добавляли 5мМ МАЛ, чтобы устранить окисление микромолярных концентраций эндогенной янтарной кислоты. По окончании процесса стекла ополаскивали дистиллированной водой и высушивали при комнатной температуре в течение 20 мин. Ядра клеток окрашивали 0,05% раствором водного нейтрального красного в течение 8 мин, затем предметные стекла промывали в течение 5-10 с в дистиллированной воде. Высушенные на воздухе мазки подвергали микроскопическому анализу не позднее чем за 1 мес после получения.

Микроскопирование мазков после окрашивания проводили на микроскопе Leica-DM 2000 с цветной фотокамерой Leica DFC 425 (Leica, Германия) при увеличении 1000х под масляной иммерсией. Из каждого мазка набирали 100 лимфоцитов. Для поиска и захвата клеток использовали разработанную компьютерную программу "BloodRunner" (свидетельство RU № 2010616976, от 19.10.2010, Россия). Для количественного морфологического анализа цветных изображений была разработана специализированная компьютерная программа "Cell Composer" (свидетельство RU № 2012618186, от 10.10.2012, Россия). Таким образом, в соответствии с принципом работы программы, основанным на обсчете площадных характеристик клеток и их компартментов, вычисляли среднюю площадь окраски диформазана (в мкм2) в выборке из 100 лимфоцитов, анализируемых от каждого животного.

Определение малонового диальдегида в сыворотке крови и митохондриях сердца и печени

Концентрацию малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови крыс определяли с использованием диагностического набора реактивов (ООО "Агат-Мед", Россия). Для получения сыворотки пробирку с цельной кровью инкубировали при 37 °С в течение 1 ч, используя водяной термостат TW-2.02 (Elmi, Россия). Над-осадочную часть собирали в чистые микропробирки и центрифугировали с помощью центрифуги Eppendorff Minispin (Eppendorff, Германия) при 1500g в течение 10 мин. Полученную сыворотку переносили в пробирки и замораживали при -80 °С для дальнейшего анализа. Концентрацию МДА в митохондриях сердца и печени крыс определяли стандартным спектрофотометрическим методом по образованию окрашенного комплекса с тиобарбитуровой кислотой при 535 нм [14]. Анализ проводили, используя 1 и 3 мг митохондрий сердца и печени соответственно. Концентрацию МДА выражали в нмоль/мг митохондриального белка.

Измерение дыхания митохондрий из сердца крыс

Митохондрии выделяли из ткани сердца крыс общепринятым методом дифференциального центрифугирования. Концентрация белка в результирующей суспензии митохондрий сердца и печени крыс составляла 30-40 и 60-70 мг/мл соответственно. Дыхание митохондрий регистрировали с помощью респирометра Oxygraph-2K (Oroboros Instruments, Австрия) при 26 °С и постоянном перемешивании. Среда инкубации содержала 100 мМ KCl, 100 мМ маннита, 25 мМ сахарозы, 5 мМ KH2PO4, 0,5 мМ ЭГТА, 5 мМ глутамата калия, 5 мМ малата калия, 10 мМ Hepes/KOH (pH 7,4). Концентрация белка в кювете составляла 0,5 мг/см3. Скорость дыхания митохондрий определяли в трех метаболических состояниях: V3 - скорость фосфорилирующего окисления в присутствии 200 мкМ АДФ, V4 - скорость дыхания после фосфорилирования добавленного АДФ, VдНФ - скорость разобщенного дыхания в присутствии 50 мкМ 2,4-динитрофенола. Время фосфорилирования и коэффициент фосфорилирования АДФ/О рассчитывали в соответствии с ранее описанной методикой [15].

Данные были проанализированы с использованием программного обеспечения GraphPad Prism 4 и Excel 6.0 и представлены как среднее значение (M) ± стандартная ошибка среднего (m). Анализ на нормальность распределения данных проводили с помощью критерия Шапиро-Уилка. Поскольку полученные данные укладывались в нормальное распределение величин, статистическую обработку полученных данных осуществляли с помощью двухфакторного дисперсионного анализа (Two-Way ANOVA) по фактору "Дигидрокверцетин" и по фактору "Изопреналин". Для последующего сравнения средних дисперсионного комплекса использовали тест Ньюмана-Кеулса. Различия между средними значениями считали статистически значимыми при p<0,05.

Результаты и обсуждение

Применение некоторых антиоксидантов в высоких концентрациях может оказывать отрицательное влияние на функционирование клеток, в частности подавлять активацию внутриклеточных сигнальных путей, запускаемых активными формами кислорода [3]. В связи с этим в начале работы было исследовано влияние двух доз ДГК-ВФ на уровень МДА и показатели функционирования митохондрий сердца и печени контрольных животных. Для этого крысам контрольных групп перорально вводили ДГК-ВФ в составе питьевой воды в течение 14 сут в дозах 15 и 30 мг на 1 кг массы тела. Применение ДГК-ВФ в концентрации 15 мг/кг приводило к незначительному снижению содержания МДА, отражающего уровень ПОЛ, в митохондриях сердца (рис. 1А) и печени (рис. 1Б) крыс, однако это изменение не достигало уровня статистической значимости. Увеличение концентрации до 30 мг/кг не усиливало данный эффект у контрольных животных.

Рис. 1. Содержание малонового диальдегида (МДА) в митохондриях сердца (А) и печени (Б) крыс контрольной группы после курсового введения водной формы дигидрокверцетина per os в дозах 15 и 30 мг на 1 кг массы тела животного (M±m, n=5)

Fig. 1. The level of malone dialdehyde (MDA) in heart (A) and liver (B) mitochondria of control rats after a course of per os administration of water-soluble form of dihydroquercetin at the doses of 15 and 30 mg per kg body weight (M±m, n=5)

В следующей части работы исследовали влияние ДГК-ВФ на скорость дыхания и показатели эффективности окислительного фосфорилирования в митохондриях сердца крыс контрольной группы. Как видно из табл. 1, использование ДГК-ВФ в двух дозах не приводило к статистически значимым изменениям биоэнергетических параметров митохондрий сердца крыс, однако при использовании дозы 15 мг/кг наблюдалась тенденция к увеличению скорости дыхания митохондрий в фосфорилирующем состоянии (V3), а доза 30 мг/кг не усиливала этот эффект.

Таблица 1. Показатели энергетического обмена в изолированных митохондриях сердца крыс контрольной группы при 14-дневном введении водной формы дигидрокверцетина (ДГК-ВФ) per os (M±m, n=5)

Table 1. Indicators of energy metabolism in isolated mitochondria of the heart of rats of the control group after 14-day administration of the water-soluble form of dihydroquercetin (DHQ-WF) per os (M±m, n=5)

П р и м е ч а н и е. V3, V4, VДНФ - скорости дыхания митохондрий сердца крыс в разных функциональных состояниях.

N o t e. V3, V4, VDNF, - respiratory rates of rat heart mitochondria in different functional states.

Результаты ЦБХ-исследования показали, что при применении ДГК-ВФ в дозе 15 мг/кг активность цитозольной ЛДГ повысилась на 36%, а повышение дозы ДГК-ВФ до 30 мг/кг отменяло этот эффект (табл. 2). В то же время статистически значимых изменений в активности СДГ в лимфоцитах крови контрольных животных при применении ДГК-ВФ в двух исследуемых дозах не обнаружено. Таким образом, ДГК-ВФ в дозе 15 мг/кг при 14-дневном приеме усиливала активность ключевого фермента гликолиза ЛДГ, но не влияла на активность фермента дыхательной цепи митохондрий СДГ в лимфоцитах крови у контрольных животных. Усиление гликолиза в лимфоцитах крови у крыс контрольной группы, вызванное действием ДГК-ВФ, соответствует данным литературы о том, что ДГК повышает адаптационную устойчивость клеток и усиливает процессы роста пролиферирующих клеток, в том числе лимфоцитов [16, 17].

Таблица 2. Показатели оксигеназной активности митохондрий (сукцинатдегидрогеназы, СДГ) и гликолитической активности в цитозоле (лактатдегидрогеназы, ЛДГ) в лимфоцитах периферической крови, определенные цитобиохимическим методом на мазках, при 14-дневном введении водной формы дигидрокверцетина (ДГК-ВФ) per os у крыс контрольной группы (M±m, n=5)

Table 2. Indicators of mitochondrial oxygenase activity (succinate dehydrogenase, SDH) and cytosol glycolytic activity (lactate dehydrogenase, LDH) in peripheral blood lymphocytes after 14-day administration of the water-soluble form of dihydroquercetin (DHA-WF) per os in rats of the control group (M±m, n=5)

П р и м е ч а н и е. * - статистически значимое (p<0,05) отличие от показателя контрольной группы в отсутствие ДГК-ВФ.

N o t e. * - the differences are statistically significant (p<0.05) compared to the control group in the absence of DHA-AF.

В связи с тем, что повышение дозы не усиливало эффекты ДГК-ВФ на исследуемые параметры, в дальнейшем мы использовали ДГК-ВФ в более низкой дозе (15 мг на 1 кг массы тела) на модели кардиомиопатии у крыс, сопровождающейся развитием окислительного стресса.

При кардиомиопатии активность СДГ и ЛДГ в лимфоцитах крови увеличивалась соответственно на 25 и 33% по сравнению с контролем (рис. 2А, Б). Выявленное повышение активности ЛДГ в лимфоцитах при кардиомиопатии согласуется с данными литературы о том, что сердечно-сосудистые патологии, включая кардиомиопатии, приводят к усилению гликолиза и накоплению лактата в крови животных [18-21]. В то же время применение ДГК-ВФ не оказывало влияния на повышенную активность цитозольной ЛДГ и митохондриальной СДГ в лимфоцитах крыс с кардиомиопатией (см. рис. 2А, Б).

Рис. 2. Активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ) (А) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) (Б) в лимфоцитах на мазке, концентрация малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови (В) крыс после курсового введения водной формы дигидрокверцетина (ДГК-ВФ) per os в дозе 15 мг/кг в четырех экспериментальных группах: контроль, контроль + ДГК-ВФ, ИЗК, ИЗК + ДГК-ВФ (M±m, n=5)

Статистически значимое (p<0,05) отличие от показателя группы: * - контроль; § - контроль + ДГК-ВФ; # - ИЗК. ДФ - окраска диформазана.

Figure 2. Succinate dehydrogenase (SDH) (А) and lactate dehydrogenase (LDH) (B) activity in peripheral blood lymphocytes on a smear, and malone dialdehyde (MDA) serum level (C) in experimental rats after a course of per os administration of the water-soluble form of dihydroquercetin (DHQ-WF) at the dose of 15 mg per kg body weight in four experimental groups: control, control + DHQ-WF, IIC, IIC + DHQ-WF (M±m, n=5)

Statistically significant (p<0.05) difference from the group indicator: * - control; § - control + DHQ-WF; # - IIC.

В следующей части работы исследовали влияние ДГК-ВФ на окислительный обмен у крыс с экспериментальной кардиомиопатией. Концентрация конечного продукта окислительной деградации липидов МДА в сыворотке крови крыс при кардиомиопатии увеличивалась в 2 раза (рис. 2В). Курсовое применение ДГК-ВФ при кардиомиопатии приводило к статистически значимому снижению уровня МДА в сыворотке крови на 45%, что подтверждает мощное антиоксидантное действие ДГК-ВФ.

Заключение

Таким образом, развитие кардиомиопатии у крыс сопровождается значительным увеличением содержания МДА в сыворотке и митохондриях сердца, а также повышением активности СДГ и ЛДГ в лимфоцитах крови. Курсовое пероральное введение ДГК-ВФ в дозе 15 мг на 1 кг массы тела крысам при кардиомиопатии приводит к снижению уровня МДА в сыворотке крови, но не влияет на повышенную активность СДГ и ЛДГ в лимфоцитах крови крыс. В контрольной группе животных ДГК-ВФ в дозе 15 мг на 1 кг массы тела увеличивает активность ЛДГ в лимфоцитах крови, а повышение дозы до 30 мг на 1 кг массы тела аннулирует этот эффект. Полученные данные указывают на то, что ДГК-ВФ действует как эффективный антиоксидант, препятствующий развитию ПОЛ в сыворотке крови крыс при кардиомиопатии, а также дополнительно может модулировать энергетический обмен в сторону усиления гликолиза в лимфоцитах крови у контрольных животных. В дальнейшем это может найти применение при разработке комплексных подходов к лечению кардиомиопатий и других сердечно-сосудистых патологий, сопровождающихся митохондриальной дисфункцией и окислительным стрессом.

ЛИТЕРАТУРА

1. Maron B.J., Ommen S.R., Semsarian C., Spirito P., Olivotto I., Maron M.S. Hypertrophic cardiomyopathy: present and future, with translation into contemporary cardiovascular medicine // J. Am. Coll. Cardiol. 2014. Vol. 64, N 1. P. 83-99. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jacc.2014.05.003

2. Леонтьева И.В., Николаева Е.А. Митохондриальные кардиомиопатии // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2016. Т. 61, № 3. С. 22-30. DOI: https://doi.org/10.21508/1027-4065-2016-61-3-22-30

3. Li J., Dong J., Ouyang J., Cui J., Chen Y., Wang F., Wang J. Synthesis, characterization, solubilization, cytotoxicity and antioxidant activity of aminomethylated dihydroquercetin // Med. Chem. Commun. 2016. Vol. 8, N 2. P. 353-363. DOI: https://doi.org/10.1039/c6md00496b

4. Islam J., Shree A., Vafa A., Afzal S.M., Sultana S. Taxifolin ameliorates benzo[a]pyrene-induced lung injury possibly via stimulating the Nrf2 signalling pathway // Int. Immunopharmacol. 2021. Vol. 96. Article ID 107566. DOI: https://doi.org/10.1016/j.intimp.2021.107566

5. Li Z., Yu Y., Li Y., Ma F., Fang Y., Ni C. et al. Taxifolin attenuates the developmental testicular toxicity induced by di-n-butyl phthalate in fetal male rats // Food Chem. Toxicol. 2020. Vol. 142. Article ID 111482. DOI: https://doi.org/10.1016/j.fct.2020.111482

6. Liu F., Ma Y., Xu Y. Taxifolin shows anticataractogenesis and attenuates diabetic retinopathy in STZ-diabetic rats via suppression of aldose reductase, oxidative stress, and MAPK signaling pathway // Endocr. Metab. Immune Disord. Drug Targets. 2020. Vol. 20, N 4. P. 599-608. DOI: https://doi.org/10.2174/1871530319666191018122821

7. Зинченко В.П., Ким Ю.А., Таpаxовcкий Ю.C., Бpонников Г.Е. Биологическая активность водорастворимых наноструктур дегидрокверцетина с циклодекстринами // Биофизика. 2011. Т. 56, № 3. С. 433-438.

8. Кондрашова М.Н., Хундерякова Н.В., Захарченко М.В., Ячкула Т.В., Плясунова С.А., Сухоруков В.С. и др. Метод определения функционального состояния митохондрий в организме у человека по показателям активности ферментов и микроскопического вида лимфоцитов крови на мазке (Цитобиохимический метод) // Медицинский алфавит. Современная лаборатория. 2016. Т. 3, № 19. С. 83-85

9. Хундерякова Н.В., Захарова Н.М. Оценка активности сукцинатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы в лимфоцитах крови у якутских сусликов Spermophilus undulatus при гибернации и в активном состоянии // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2020. Т. 169, № 4. С. 426-430. DOI: https://doi.org/10.1007/s10517-020-04906

10. Frelikh G.A., Yanovskaya E.A., Polomeeva N.Yu., Timofeev M.S., Slepichev V.A., Bryushinina O.S. et al. Determination of mitochondrial functional state in vital tissues by cytobiochemical analysis of peripheral blood lymphocytes // Open J. Endocr. Metab. Dis. 2013. Vol. 3, N 2. P. 10-13. DOI: https://doi.org/10.4236/ojemd.2013.32A002

11. Khunderyakova N.V., Yachkula T.V., Zakharchenko M.V., Plyasunova S.A., Sukhorukov V.S., Baranich N.I. et al. Cytobiochemical biomarkers of the state of mitochondria in humans // J. World Mitochondria Soc. 2017. Vol. 2. N 2. P. 118. DOI: https://doi.org/10.18143/JWMS_v2i2_1930

12. Скупневский С.В., Пухаева Е.Г., Бадтиев А.К., Руруа Ф.К., Батагова Ф.Э., Фарниева Ж.Г. Функциональные особенности лимфоцитов периферической крови в динамике аутоиммунного артрита у крыс // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2019. № 12. С. 82-87.

13. Siddiqui M.A., Ahmad U., Khan A.A., Ahmad A., Badruddeen A., Khalid M. et al. Isoprenaline: a tool for inducing myocardial infarction in experimental animals // Int. J. Pharm. 2016. Vol. 6, N 2. P. 138-144.

14. Ohkawa H., Ohishi N., Yagi K. Assay for lipid peroxides in animal tissues by thiobarbituric acid reaction // Anal. Biochem. 1979. Vol. 95, N 2. P. 351-358. DOI: https://doi.org/10.1016/0003-2697(79)90738-3

15. Venediktova N.I., Gorbacheva O.S., Belosludtseva N.V., Fedotova I.B., Surina N.M., Poletaeva I.I. et al. Energetic, oxidative and ionic exchange in rat brain and liver mitochondria at experimental audiogenic epilepsy (Krushinsky-Molodkina model) // J. Bioenerg. Biomembr. 2017. Vol. 49. P. 149-158. DOI: https://doi.org/10.1007/s10863-016-9693-5

16. Ward P.S., Thompson C.B. Metabolic reprogramming: a cancer hallmark even warburg did not anticipate // Cancer Cell. 2012. Vol. 21. P. 297-308. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ccr.2012.02.014

17. Pavlova N.N., Thompson C.B. The emerging hallmarks of cancer metabolism // Cell Metab. 2016. Vol. 23. P. 27-47. DOI: https://doi.org/10.1016/j.cmet.2015.12.00

18. Kolwicz S.C. Jr, Tian R. Glucose metabolism and cardiac hypertrophy // Cardiovasc. Res. 2011. Vol. 90, N 2. P. 194-201. DOI: https://doi.org/10.1093/cvr/cvr071

19. Drent M., Cobben N.A., Henderson R.F., Wouters E.F., van Dieijen-Visser M. Usefulness of lactate dehydrogenase and its isoenzymes as indicators of lung damage or inflammation // Eur. Respir. J. 1996. Vol. 9, N 8. P. 1736-1742. DOI: https://doi.org/10.1183/09031936.96.09081736

20. Luengo A., Li Z., Gui Dan Y., Spranger S., Matheson N.J., Vander Heiden M.G. Increased demand for NAD+ relative to ATP drives aerobic glycolysis // Mol. Cell. 2021. Vol. 81. P. 691-707. DOI: https://doi.org/10.1016/j.molcel.2020.12.012

21. Аметов А.С., Кониева М.Ю., Лукьянова И.В. Сердечно-сосудистая система при тиреотоксикозе // Consilium Medicum. 2003. Т. 5, № 11. С. 660-663.

SCImago Journal & Country Rank
Scopus CiteScore
ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР
ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР
Тутельян Виктор Александрович
Академик РАН, доктор медицинских наук, профессор, научный руководитель ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии»
РОСМЕДОБР 2021
Вскрытие
Медицина сегодня
Евро-Азиатская конференция по офтальмохирургии.

28-29 апреля 2022 г. в Екатеринбурге состоится IX Евро-Азиатская конференция по офтальмохирургии (ЕАКО). Свое название конференция получила неслучайно, ведь именно в городе, расположенном на границе Европы и Азии, раз в два года встречаются офтальмологи из разных регионов...

Актуальные вопросы нейроофтальмологии,

Уважаемые коллеги! 28 января 2022 года состоится XXI научно-практическая нейроофтальмологическая конференция " Актуальные вопросы нейроофтальмологии. Поражение зрительного нерва: взгляд офтальмолога, невролога, вирусолога-ифекциониста, нейрохирурга " Конференция посвящается...

Конгресс, посвященный Всемирному дню борьбы с ожирением.

В Москве пройдет Конгресс, посвященный Всемирному дню борьбы с ожирением, с международным участием С 28 февраля по 2 марта 2022 года пройдет научно-образовательное мероприятие для врачей - Конгресс, посвященный Всемирному дню борьбы с ожирением. Ожирение представляет одну из...


Журналы «ГЭОТАР-Медиа»