Determination of carbohydrate content in soft drinks. Methodological aspects and results of research using various methods

• Konstantin V. Kobelev
• Elena M. Sevostyanova
• Larisa N. Kharlamova
• Irina V. Lazareva
• Lyudmila М. Khomich

Abstract

An important component of the programs to prevent type 2 diabetes mellitus, obesity, and other chronic noncommunicable diseases is limiting the intake of added sugars. Information about the composition of the product and its nutritional value contained in the labeling contributes to the informed choice of consumers when forming a diet. On July 1, 2023, new provisions of the Tax Code of the Russian Federation came into force, providing for the imposition of an excise tax on “sugar-containing drinks” – soft drinks made with added sugar and containing carbohydrates in quantities of more than 5 g/100 ml. The stated goal of the new excise regulation is to reduce sugar consumption by the population. Currently, information on the carbohydrate content in soft drinks is provided by manufacturers based on calculated values according to the recipe, which makes it possible to take into account as much as possible all the carbohydrate components of the product. There is no standardized method for analytically assessing the carbohydrate content of soft drinks (including “sugar-sweetened beverages” for excise tax purposes).

The purpose of the work was the comparative analysis of existing analytical methods for determining the content of sugars and carbohydrates in general in foods, including beverages; and determination of the most correct analytical approach to assessing the content of carbohydrates in soft drinks.

Material and methods. The existing methods for determining sugars and carbohydrates in foods, including beverages, have been analyzed. The objects of research were samples of model aqueous solutions with different sugar concentrations (30 samples) and 17 samples of industrially produced soft drinks (including tonic and tonic energy drinks) made using sugar or sugars (glucose-fructose syrup), sweeteners, and a mixture of sugar and sweeteners. The total content of sugars/carbohydrates in beverages was determined: in accordance with MU 10-05031531-372-93 as the difference between the total dry matter content and the dry matter from acids; by the Bertrand method; by the Bertrand–Schorl method. The obtained values were compared with the calculated data specified in the labeling of consumer packaging of the products.

Results. The determination of sugars in model solutions showed sufficient accuracy of the Bertrand–Schorl method: deviations of the obtained values from the amount of sugars added to the model solution were observed only at their high concentration (over 10 g/100 ml) and amounted to ±0.1 g/100 ml. The carbohydrate content in industrial soft drinks estimated by various methods differed slightly from that indicated in the labeling (obtained by calculation). The differences were at the level from -0.2 to +0.4 g/100 ml when using the method from MU 10-05031531-372-93, at the level from -2.6 to +0.8 g/100 ml when using the Bertrand method and at the level from -2.7 to +0.1 g/100 ml when using the Bertrand–Schorl method. The greatest differences were observed for tonic drinks (including energy drinks) – from -2.7 to +0.3 g /100 ml, depending on the method.

Conclusion. The research data showed that the Bertrand–Schorl method can be used as a basis for developing a state standard for determining the total sugar content in soft drinks and for assessing their carbohydrate content in general. At the same time, the method needs to be refined for tonic drinks. At present, the most acceptable method is to assess the carbohydrate content using the analytical method given in MU 10-05031531-372-93, but it should be taken into account that deviations from the carbohydrate content values determined by this method from the values obtained by calculation can be up to +10%. At the same time, the calculation method for determining the carbohydrate content in drinks remains a priority, including for the purposes of excise regulation.

Keywords: carbohydrates; sugars; soft drinks; inversion; dry matter; nutritional value

References

1. Guide to sugar intake for adults and children. Summary. Geneva: WHO? 2015: 49 p. URL: https://www.who.int/publications/i/item/

9789241549028

2. Sergeeva V.A. Hidden (added) sugar and clear cardiovascular risk: literature review. CardioSomatika [CardioSomatics]. 2023; 14 (2): 105–14. DOI: https://doi.org/10.17816/CS399808 (in Russian)

3. Ma Y., He F.J., Yin Y., Hashem K.M., MacGregor G.A. Gradual reduction of sugar in soft drinks without substitution as a strategy to reduce overweight, obesity, and type 2 diabetes: a modelling study. Lancet Diabetes Endocrinol. 2016; 4 (2): 105–14. DOI: https://doi.org/10.1016/S2213-8587(15)00477-5

4. Pavlovskaya E.V. Influence of excessive sugar consumption on children’s health. Voprosy prakticheskoy pediatrii [Problems of Practical Pediatrics]. 2017; 12 (6): 65–9. DOI: https://doi.org/10.20953/1817-7646-2017-6-65-69 (in Russian)

5. Mikhaylichenko K.A., Babenko A.I., Andreeva O.V. Excise on sugared beverages: pro et contra. Vektor ekonomiki [Vector of the Economy]. 2023; 4 (82). DOI: https://doi.org/10.51691/2500-3666_2023_4_15 (in Russian)

6. Allais O., Enderli G., Sassi F., Soler L.G. Effective policies to promote sugar reduction in soft drinks: lessons from a comparison of six European countries. Eur J Public Health. 2023; 33 (6): 1095–101. DOI: https://doi.org/10.1093/eurpub/ckad157

7. Cullum A. Developing food-based dietary recommendations in the UK. Proc Nutr Soc. 2024; 83 (1): 55–61. DOI: https://doi.org/10.1017/S0029665123003658

8. Emmert-Fees K.M.F., Amies-Cull B., Wawro N., Linseisen J., Staudigel M., Peters A., et al. Projected health and economic impacts of sugar-sweetened beverage taxation in Germany: a cross-validation modelling study. PLoS Med. 2023; 20 (11): e1004311. DOI: https://doi.org/10.1371/journal.pmed.1004311

9. Nutrient profiles of juices (handbook). Moscow: Planeta, 2020: 176 p. ISBN 978-5-6044171-5-7. (in Russian)

10. Khomich L.М., Mil’rud V.E. Methodological aspects of determining (estimating) the content of carbohydrates in juice products when placing information for consumers on packaging. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2022; 91 (2): 81–92. DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2022-91-2-81-92 (in Russian)

11. Chernobrovina A.G., Kulikova N.E., Roeva N.N., Popova O.Ju. Optimization of sucrose inversion conditions and evaluation of the accelerated ferricyanide method for determining total sugar. Analitika [Analytics]. 2023; 13 (3): 206–14. DOI: https://doi.org/10.22184/2227-572X.2023.13.3.206.214 (in Russian)

12. Boldyreva O.I., Mozgunova E.M. Methods of food research. Orenburg: OGU, 2012: 73 p. (in Russian)

13. Kul’neva N.G. The use of modern methods in assessing the quality of sugars. In: Problems and prospects for scientific and innovative support of the regional agro-industrial complex. Collection of reports of the IV International Scientific and Practical Conference, Kursk, July 13–15, 2022. Kursk: Federal Agricultural Kursk Research Center, 2022: 356. DOI: https://doi.org/10.18411/isbn978-5-907407-69-5-2022 ISBN 978-5-907407-69-5. (in Russian)

14. Komarova V.I., Tyrina S.M. A simple method for quantitative determination of glucose levels in fruits and drinks. Khranenie i pererabotka sel’khozsyr’a [Storage and Processing of Agricultural Raw Materials]. 2005; (3): 49. (in Russian)

15. Shakir I.V., Krasnoshtanova A.A., Parfenova Ye.V., Suyasov N.A., Babusenko Ye.S., Smirnova V.D. General biotechnology. Laboratory workshop. Textbook. Moscow.: D. I. Mendeleev Russian University of Chemical Technology, 2008: 120 p. ISBN 978-5-7237-0682-8. (in Russian)

16. Pham T., Phan N.N.D.H., Tran V.G., Nguyen T.Q., Tran M.D., Nguyen T.H. Analysis of a major phenolic glucoside and biochemistry compounds from Curculigo orchioides Gaertn. Rep Biochem Mol Biol. 2022; 10 (4): 565–72. DOI: https://doi.org/10.52547/rbmb.10.4.565

17. Akimov M.Yu., Zhbanova E.V., Makarov V.N., Perova I.B., Shevyakova L.V., Vrzhesinskaya O.A., et al. Nutrient value of fruit in promising strawberry varieties. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2019; 88 (2): 64–72. DOI: https://doi.org/10.24411/0042-8833-2019-10019 (in Russian)

18. Korenman Ya.I., Mokshina N.Ya., Bychkova A.A. Physico-chemical determination of carbohydrates in food products and drinks. Vestnik VGUIT [Bulletin of VGUIT]. 2014; (1): 146–52. DOI: https://doi.org/10.20914/2310-1202-2014-1-146-153 (in Russian)

19. Mel’sitova I.V. Food quality and safety: a manual. In 2 pts. Pt 1. Food quality. Minsk: BGU, 2014: 183 p. URL: http://elib.bsu.by/handle/123456789/113997 (in Russian)

20. Eller K.I., Perova I.B. Trends in the development of analytical methods for determination of the quality and authenticity of foodstuffs. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2020; 89 (4): 255–61. DOI: https://doi.org/10.24411/0042-8833-2020-10059 (in Russian)

21. Gareev B.M., Abdrakhmanov A.M., Sharipov G.L. Luminescent determination of sugar in natural honey. Izvestiya Ufimskogo nauchnogo centra [News of the Ufa Scientific Center]. 2020; (4): 29–32. DOI: https://doi.org/10.31040/2222-8349-2020-0-4-29-32 (in Russian)

22. Trineeva O.V., Slivkin A.I. Determination of simple sugars in medicinal plant raw materials by high-performance thin-layer chromatography (using the example of sea buckthorn fruits and stinging nettle leaves). Khimiya rastitel’nogo syr’ia [Chemistry of Plant Raw Material]. 2020; (1): 215–22. DOI: https://doi.org/10.14258/jcprm.2020015122 (in Russian)

23. Kropacheva T.N., Ivanov D.A. Electrochemical determination of carbohydrates in wines using copper electrodes. Vestnik tekhnologicheskogo universiteta [Bulletin of the Technological University]. 2023; 26 (7): 32–6. DOI: https://doi.org/10.55421/1998-7072_2023_26_7_32 (in Russian)

24. Khaliullin R.Sh., Ul’rikh E.V. Determination of sugar content in carrots by refractometry. Dostizheniya nauki i tekhniki APK [Achievements of Science and Technology of the Agro-Industrial Complex]. 2019; (1): 50–5. DOI: https://doi.org/10.24411/0235-2451-2019-10112 (in Russian)

Материал и методы

На основе проведенного анализа существующих аналитических способов определения содержания сахаров/углеводов в пищевой продукции в целом и в безалкогольных напитках в частности для проведения экспериментальных исследований были выбраны и применены основанные на редуцирующей способности сахаров по отношению к ионам Cu (II) метод Бертрана и метод Бертрана-Шорля, а также дополнительно для безалкогольных напитков промышленного производства - метод, описанный в МУ 10-05031531-372-93, оценивающий содержание углеводов в напитках как разницу общего содержания в них сухих веществ и сухих веществ, вносимых кислотами. Эти методы отличаются простотой выполнения, не требуют высоких трудозатрат и дорогостоящих приборных решений и при этом могут обеспечить достаточную точность при оценке содержания углеводов в напитках аналитическим путем.

Сравнительная оценка содержания сахаров разными способами выполнена на образцах модельных растворов (30 образцов) с различным содержанием и соотношением сахаров (сахарозы, глюкозы, фруктозы) в концентрации от 0,2 до 15,0%, смесей сахарозы и фруктозы/глюкозы и в образцах напитков промышленного производства (17 образцов), изготовленных с использованием сахара, сахаров [глюкозно-фруктозного сиропа (ГФС)], подсластителей, смеси сахара с подсластителями. Образцы напитков были приобретены в торговой сети и разбиты на 3 группы: напитки безалкогольные - 10 образцов (на сахаре, на сахаре с добавлением концентрированных соков, на ГФС, на смеси сахара с подсластителями, на подсластителях), тонизирующие - 2 образца (на сахаре с подсластителями, на подсластителях), энергетические - 5 образцов (на сахаре, на ГФС). Исследования проводили в трех повторностях, погрешность определения составляла не более 2 %.

Результаты и обсуждение

На первом этапе исследований определяли сахара на модельных водных растворах с различным составом и соотношением сахаров методом Бертрана в соответствии с ГОСТ 13192-73 и методом Бертрана-Шорля.

Для модельных растворов, содержащих сахарозу, одну или в комбинации с глюкозой или фруктозой, при применении метода Бертрана-Шорля инверсию проводили двумя способами - в соответствии с ГОСТ 13192-73 и ГОСТ 6687.2-90.

Метод, описанный в ГОСТ 13192-73, основан на восстановлении инвертным сахаром окисной формы меди в растворе Фелинга в закисную. Последнюю переводят в окисную с помощью сернокислой окиси железа. Образовавшуюся закись железа определяют перманганатометрически. При этом инверсия проводится раствором соляной кислоты массовой концентрацией 20 г/100 см³ на водяной бане при 67-69 °С в течение 5 мин.

Инверсию растворов сахаров по ГОСТ 6687.2-90 проводят раствором соляной кислоты с массовой долей 8,49% на кипящей водяной бане в течение 1 ч.

Результаты показывают, что в модельных растворах, содержащих сахарозу или смеси сахарозы с фруктозой или глюкозой в различных концентрациях, наиболее подходящим методом определения общих сахаров оказался метод Бертрана-Шорля с инверсией по ГОСТ 6687.2-90. Отклонение от реального содержания сахаров в модельных растворах в этом случае было наименьшим (табл. 1).

Определение сахаров в модельных растворах, содержащих только фруктозу или глюкозу, также показало достаточную точность метода Бертрана-Шорля: отклонения от содержания добавленной в модельный раствор фруктозы/глюкозы наблюдались лишь при высокой концентрации добавленных сахаров (свыше 10 г/100 мл) и составляли ±0,1 г/100 мл. Результаты представлены в табл. 2.

На следующем этапе работы оценивали содержание углеводов в образцах напитков промышленного производства. Суммарное содержание углеводов определяли в соответствии с МУ 10-05031531-372-93. Также в образцах оценивали общее содержание сахаров методами Бертрана и Бертрана-Шорля. При этом особое внимание уделялось проведению инверсии, так как режимы ее проведения значительно влияют на конечный результат. Необходимо отметить, что инверсия сахарозы, происходящая в кислой среде, характерной для безалкогольных напитков, может приводить в процессе их хранения к росту значений содержания сухих веществ на 2-4%. Это необходимо иметь в виду при оценке содержания углеводов в продукте с использованием МУ 10-05031531-372-93, где измерение сухих веществ напитка является одним из ключевых этапов проведения исследования, и сравнении полученного значения с расчетным, заявленным в маркировке. Результаты исследований напитков промышленного производства представлены в табл. 3.

Как видно из представленных данных, полученные результаты определения содержания углеводов или сахаров (как основной углеводной составляющей напитка) отличаются от указанного в маркировке. Различия находятся на уровне от -0,2 до +0,4 г/100 мл при использовании методики из МУ 10-05031531-372-93, на уровне от -2,6 до +0,8 г/100 мл при использовании метода Бертрана и на уровне от -2,7 до +0,1 г/100 мл при использовании метода Бертрана-Шорля.

Наиболее значительные отличия получены для тонизирующих напитков и тонизирующих энергетических напитков - от -2,7 до +0,3 г/100 мл в зависимости от метода. Скорее всего, это связано с компонентами, входящими в их состав, такими как гуммиарабик, эфиры глицерина и смоляных кислот, кофеин, чай мате и т.д., влияющими на пищевую матрицу. Для остальных безалкогольных напитков отличия измеренных концентраций углеводов от указанного в маркировке содержания находятся на уровне от -0,1 до +0,8 г/100 мл. При этом обращает на себя внимание, что для тонизирующих напитков (в том числе энергетических) более характерны и наиболее велики отрицательные отклонения.

На уровне концентраций углеводов, наиболее чувствительных с точки зрения акцизного налогообложения (5 г/100 мл - граница отнесения напитков к "сахаросодержащим", образцы 5-9), содержание углеводов, полученное различными способами, отличается от заявленного в маркировке на -0,2/+0,4 г/100 мл.

Заключение

На основании полученных данных наилучшее совпадение измеренного и указанного в маркировке (устанавливается изготовителем расчетным путем исходя из рецептуры и учитывает все углеводные составляющие напитка) содержания углеводов в напитках наблюдается при применении методики из МУ 10-05031531-372-93 (-0,2 до +0,4 г/100 мл). Несколько большее расхождение наблюдается при применении метода Бертрана-Шорля (-2,7 до +0,1 г/100 мл) и метода Бертрана (-2,6 до +0,8 г/100 мл). При этом максимальные различия при применении методов Бертрана и Бертрана-Шорля наблюдаются для напитков, имеющих более сложный компонентный состав, таких как тонизирующие и тонизирующие энергетические. Целесообразна доработка этих методов (в первую очередь метода Бертрана-Шорля) в части подобных напитков. При этом следует понимать, что данные методы измеряют сумму сахаров - базовую углеводную составляющую напитков, но другие углеводы, возможно, также содержащиеся в напитках, не учитываются.

На настоящий момент (до доработки метода Бертрана-Шорля) наиболее подходящим аналитическим способом оценки содержания углеводов в напитках (и при этом наиболее простым и недорогим в исполнении) представляется метод из МУ 10-05031531-372-93, основанный на измерении содержания сухих веществ и кислотности напитка и вычитания одного из другого. При этом для оценки корректности маркировки в части содержания углеводов, в том числе в целях акцизного регулирования, нужно учитывать, что отклонение от расчетных значений содержания углеводов в напитках при исследовании с применением данного метода может составлять до 10%. Приоритетным же остается расчетный путь определения содержания углеводов в напитке, как полностью учитывающий его углеводную составляющую.

Литература

1. Руководство по потреблению сахаров взрослыми и детьми. Резюме. Женева : ВОЗ, 2015. 49 с. URL: https://www.who.int/publications/i/item/9789241549028

2. Сергеева В.А. Скрытые (добавленные) сахара и явные риски для сердечно-сосудистой системы: обзор литературы // CardioСоматика. 2023. Т. 14, № 2. С. 105-114. DOI: https://doi.org/10.17816/CS399808

3. Ma Y., He F.J., Yin Y., Hashem K.M., MacGregor G.A. Gradual reduction of sugar in soft drinks without substitution as a strategy to reduce overweight, obesity, and type 2 diabetes: a modelling study // Lancet Diabetes Endocrinol. 2016. Vol. 4, N 2. Р. 105-114. DOI: https://doi.org/10.1016/S2213-8587(15)00477-5

4. Павловская Е.В. Влияние избыточного потребления сахара на здоровье детей // Вопросы практической педиатрии. 2017. Т. 12, № 6. С. 65-69. DOI: https://doi.org/10.20953/1817-7646-2017-6-65-69

5. Михайличенко К.А., Бабенко А.И., Андреева О.В. Акциз на сахаросодержащие напитки: pro et contra // Вектор экономики. 2023. № 4 (82). DOI: https://doi.org/10.51691/2500-3666_2023_4_15

6. Allais O., Enderli G., Sassi F., Soler L.G. Effective policies to promote sugar reduction in soft drinks: lessons from a comparison of six European countries // Eur. J. Public Health. 2023. Vol. 33, N 6. Р. 1095-1101. DOI: https://doi.org/10.1093/eurpub/ckad157

7. Cullum A. Developing food-based dietary recommendations in the UK // Proc. Nutr. Soc. 2024. Vol. 83, N 1. Р. 55-61. DOI: https://doi.org/10.1017/S0029665123003658

8. Emmert-Fees K.M.F., Amies-Cull B., Wawro N., Linseisen J., Staudigel M., Peters A. et al. Projected health and economic impacts of sugar-sweetened beverage taxation in Germany: a cross-validation modelling study // PLoS Med. 2023. Vol. 20, N 11. Article ID e1004311. DOI: https://doi.org/10.1371/journal.pmed.1004311

9. Нутриентные профили соков (справочник). Москва : Планета, 2020. 176 с. ISBN 978-5-6044171-5-7.

10. Хомич Л.М., Мильруд В.Е. Методические аспекты определения (оценки) содержания углеводов в соковой продукции при вынесении информации для потребителей на упаковку // Вопросы питания. 2022. Т. 91, № 2. С. 81-92. DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2022-91-2-81-92

11. Чернобровина А.Г., Куликова Н.Е., Роева Н.Н., Попова О.Ю. Оптимизация условий инверсии сахарозы и оценка ускоренного феррицианидного метода определения общего сахара // Аналитика. 2023. Т. 13, № 3. С. 206-214. DOI: https://doi.org/10.22184/2227-572X.2023.13.3.206.214

12. Болдырева О.И., Мозгунова Е.М. Методы исследования пищевых продуктов. Оренбург : ОГУ, 2012. 73 с.

13. Кульнева Н.Г. Использование современных методов при оценке качества сахаров // Проблемы и перспективы научно-инновационного обеспечения агропромышленного комплекса регионов : сборник докладов IV Международной научно-практической конференции, Курск, 13-15 июля 2022 года. Курск : ФГБНУ "Курский ФАНЦ", 2022. С. 356. DOI: https://doi.org/10.18411/isbn978-5-907407-69-5-2022 ISBN 978-5-907407-69-5.

14. Комарова В.И., Тырина С.М. Простой метод количественного определения уровня глюкозы в плодах и напитках // Хранение и переработка сельхозсырья. 2005. № 3. С. 49.

15. Шакир И.В., Красноштанова А.А., Парфенова Е.В., Суясов Н. А., Бабусенко Е. С., Смирнова В. Д. Общая биотехнология. Лабораторный практикум : учебное пособие. Москва : РХТУ им. Д.И. Менделеева, 2008. 120 с. ISBN 978-5-7237-0682-8.

16. Pham T., Phan N.N.D.H., Tran V.G., Nguyen T.Q., Tran M.D., Nguyen T.H. Analysis of a major phenolic glucoside and biochemistry compounds from Curculigo orchioides Gaertn // Rep. Biochem. Mol. Biol. 2022. Vol. 10, N 4. Р. 565-572. DOI: https://doi.org/10.52547/rbmb.10.4.565

17. Акимов М.Ю., Жбанова Е.В., Макаров В.Н., Перова И.Б., Шевякова Л.В., Вржесинская О.А. и др Пищевая ценность плодов перспективных сортов земляники // Вопросы питания. 2019. Т. 88, № 2. С. 64-72. DOI: https://doi.org/10.24411/0042-8833-2019-10019

18. Коренман Я.И., Мокшина Н.Я., Бычкова А.А. Физико-химическое определение углеводов в пищевых продуктах и напитках // Вестник ВГУИТ. 2014. № 1. С. 146-152. DOI: https://doi.org/10.20914/2310-1202-2014-1-146-153

19. Мельситова И.В. Качество и безопасность продуктов питания: пособие. В 2 ч. Ч. 1. Качество продуктов питания. Минск: БГУ, 2014. 183 с. URL: http://elib.bsu.by/handle/123456789/113997

20. Эллер К.И., Перова И.Б. Тенденции развития аналитических методов определения качества и подлинности пищевых продуктов // Вопросы питания. 2020. № 4. С. 255-261. DOI: https://doi.org/10.24411/0042-8833-2020-10059

21. Гареев Б.М., Абдрахманов А.М., Шарипов Г.Л. Люминесцентное определение сахара в натуральном меде // Известия Уфимского научного центра. 2020. № 4. С. 29-32. DOI: https://doi.org/10.31040/2222-8349-2020-0-4-29-32

22. Тринеева О.В., Сливкин А.И. Определения простых сахаров в лекарственном растительном сырье методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии (на примере плодов облепихи крушиновидной и листьев крапивы двудомной) // Химия растительного сырья. 2020. № 1. С. 215-222. DOI: https://doi.org/10.14258/jcprm.2020015122

23. Кропачева Т.Н., Иванов Д.А. Электрохимическое определение углеводов в винах с использованием медных электродов // Вестник технологического университета. 2023. Т. 26, № 7. С. 32-36. DOI: https://doi.org/10.55421/1998-7072_2023_26_7_32

24. Халиуллин Р.Ш., Ульрих Е.В. Определение содержания сахаров в плодах моркови методом рефрактометрии// Достижения науки и техники АПК. 2019. № 1. С. 50-55. DOI: https://doi.org/10.24411/0235-2451-2019-10112

All articles in our journal are distributed under the CC BY-NC-ND 4.0 (Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International)

© GEOTAR-Media Publishing Group. The use of textual and illustrative content from this publication for the training of any artificial intelligence systems - including machine learning models and neural networks - is strictly prohibited without the prior written consent of the copyright holder.