Liver gene expression in normal and obese rats received resveratrol and L-carnitine

• Nikita V. Trusov
• Mikhail O. Semin
• Vladimir A. Shipelin
• Sergey A. Apryatin
• Ivan V. Gmoshinski

Abstract

The use of nutraceuticals with anti-inflammatory and hypolipidemic activity in the composition of foods for special dietary uses and dietary supplements is one of the effective methods of dietary therapy of alimentary obesity and related diseases.

The aim was to study the effect of the combined intake of resveratrol and L-carnitine (RC) on the expression of genes responsible for the metabolism of carbohydrates, fats and inflammatory reactions in the liver and kidneys of rats in normal conditions and with diet-induced obesity.

Material and methods. Male Wistar rats received for 63 days a standard balanced diet or a high-fat-high-carbohydrate diet (HFCD) with an excess of total fat (30%) and fructose (20% solution instead of drinking water), or the same diets supplemented with RC in a low (25 mg/kg body weight as resveratrol and 300 mg/kg as L-carnitine) or high (50 and 600 mg/kg body weight, respectively) doses. The expression of genes (Khk, Gck, Pklr, Acaca, Acacb, Fasn, Scd, Srebfl, Mlxipl, Ppara, Pparg, Actb, Gapdh) in liver cells was studied by the method of real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The distribution of tyrosine aminotransferase (TAT), nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (NRF-2) and intercellular adhesion molecule type 2 (ICAM-2) in the liver and kidneys was assessed by confocal laser microscopy and immunohistochemistry.

Results. Increased expression of Fasn (fatty acid synthase) in rats treated with high-fat high-carbohydrate diet (HFCD) decreased under RC intake. RC consumption caused a decrease in the number of TAT-, NRF-2- and ICAM-2-positive cells in the liver of rats treated with HFCD, but had the opposite effect in the kidneys. The consumption of RC at the low dose by rats fed HFCD caused changes in the expression profiles of the studied marker genes, indicating a possible hypolipidemic effect. However, observed increased expression of lipogenic genes in the liver and elevated level of NRF-2 and ICAM-2 in kidney against the background of consumption of RC with the standard balanced diet cannot be assessed as unambiguously positive.

Conclusion. Thus, possible negative effects caused, most likely, by the interaction of nutraceuticals with various mechanisms of action should be taken into account when developing formulations of dietary supplements and foods for special dietary uses for dietary therapy of obesity.

Keywords:obesity, rats, resveratrol, carnitine, gene expression, polymerase chain reaction, confocal microscopy

References

1. Rauf A., Imran M., Suleria H.A.R., Ahmad B., Peters D.G., Mubarak M.S. A comprehensive review of the health perspectives of resveratrol. Food Funct. 2017; 8 (12): 4284–305. DOI: https://doi.org/10.1039/c7fo01300k

2. Malaguarnera L. Influence of resveratrol on the immune response. Nutrients. 2019; 11 (5): 946. DOI: https://doi.org/10.3390/nu11050946

3. Longo N., Frigeni M., Pasquali M. Carnitine transport and fatty acid oxidation. Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 2016; 1863 (10): 2422–35. DOI: https://doi.org/10.1016/j.bbamcr.2016.01.023

4. Panchal S.K., Poudyal H., Ward L.C., Waanders J., Brown L. Modulation of tissue fatty acids by L-carnitine attenuates metabolic syndrome in diet-induced obese rats. Food Funct. 2015; 6 (8): 2496–506. DOI: https://doi.org/10.1039/c5fo00480b

5. Wang S., Xu J., Zheng J., Zhang X., Shao J., Zhao L., Hao J. Anti-inflammatory and antioxidant effects of acetyl-l-carnitine on atherosclerotic rats. Med Sci Monit. 2020; 26: e920250. DOI: https://doi.org/10.12659/MSM.920250

6. Traina G. The neurobiology of acetyl-L-carnitine. Front Biosci (Landmark Ed). 2016; 21: 1314–29. DOI: https://doi.org/10.2741/4459

7. Ma S., Feng J., Zhang R., Chen J., Han D., Li X., et al. SIRT1 Activation by resveratrol alleviates cardiac dysfunction via mitochondrial regulation in diabetic cardiomyopathy mice. Oxid Med Cell Longev. 2017; 2017: 4602715. DOI: https://doi.org/10.1155/2017/4602715

8. Saqib U., Kelley T.T., Panguluri S.K., Liu D., Savai R., Baig M.S., et al. Polypharmacology or promiscuity? Structural interactions of resveratrol with its bandwagon of targets. Front Pharmacol. 2018; 9: 1201. DOI: https://doi.org/10.3389/fphar.2018.01201

9. Misawa T., Saitoh T., Kozaki T., Park S., Takahama M., Akira S. Resveratrol inhibits the acetylated-tubulin-mediated assembly of the NLRP3-inflammasome. Int Immunol. 2015; 27: 425–34. DOI: https://doi.org/10.1093/intimm/dxv018

10. Guide for the care and use of laboratory animals. 8th ed. In: Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals; Institute for Laboratory Animal Research (ILAR); Division on Earth and Life Studies (DELS); National Research Council of the national academies. Washington: The National Academies Press, 2011.

11. Shipelin V.A., Shumakova A.A., Semin M.O., Trusov N.V., Balakina A.S., Timonin A.N., et al. Influence of the L-carnitine and resveratrol complex on physiological, biochemical and morphological indicators of normal and obese rats. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2021; 90 (1): 15–32. DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2021-90-1-15-32 (in Russian)

12. Apryatin S.A., Shipelin V.A., Trusov N.V., Mzhelskaya K.V., Evstratova V.S., Kirbaeva N.V., et al. Comparative analysis of the influence of a high-fat/high-carbohydrate diet on the level of anxiety and neuromotor and cognitive functions in Wistar and DAT-KO rats. Physiol Rep. 2019; 7 (4): e13987. DOI: https://doi.org/10.14814/phy2.13987

13. Livak K.J., Schmittgen T.D. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) method. Methods. 2001; 25 (4): 402–8. DOI: https://doi.org/10.1006/meth.2001.1262

14. Botros M., Sikaris K.A. The De Ritis ratio: the test of time. Clin Biochem Rev. 2013; 34: 117–30.

15. Mzhel’skaya K.V., Trusov N.V., Apryatin S.A., Soto C.J., Gmoshinski I.V., Tutel’yan V.A. Effect of quercetin on the expression of the carbohydrate and lipid metabolism genes in the liver of rats with genetic and alimentary obesity. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2019; 88 (2): 6–16. DOI: 10.24411/0042-8833-2019-10012 (in Russian)

16. Buqué X., Martínez M.J., Cano A., Miquilena-Colina M.E., García-Monzón C., Aspichueta P., et al. A subset of dysregulated metabolic and survival genes is associated with severity of hepatic steatosis in obese Zucker rats. J Lipid Res. 2010; 51 (3): 500–13. DOI: https://doi.org/10.1194/jlr.M001966

17. Vilà L., Rebollo A., Ađalsteisson G.S., Alegret M., Merlos M., Roglans N., et al. Reduction of liver fructokinase expression and improved hepatic inflammation and metabolism in liquid fructose-fed rats after atorvastatin treatment. Toxicol Appl Pharmacol. 2011; 251 (1): 32–40. DOI: https://doi.org/10.1016/j.taap.2010.11.011

18. Rutledge A.C., Khosrow A. Fructose and the metabolic syndrome: pathophysiology and molecular mechanisms. Nutr Rev. 2007; 65 (6 pt 2): S13–23. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1753-4887.2007.tb00322.x

19. Jiang F., Zhang Z., Zhang Y., Pan X., Yu L., Liu S. L-Carnitine ameliorates cancer cachexia in mice partly via the carnitine palmitoyltransferase-associated PPAR-γ signaling pathway. Oncol Res Treat. 2015; 38 (10): 511–6. DOI: https://doi.org/10.1159/000439550

20. Liu L., Zhang D.M., Wang M.X., Fan C.Y., Zhou F., Wang S.J., et al. The adverse effects of long-term l-carnitine supplementation on liver and kidney function in rats. Hum Exp Toxicol. 2015; 34 (11): 1148–61. DOI: https://doi.org/10.1177/0960327115571767

21. Dong W., Wang X., Bi S., Pan Z., Liu S., et al. Inhibitory effects of resveratrol on foam cell formation are mediated through monocyte chemotactic protein-1 and lipid metabolism-related proteins. Int J Mol Med. 2014; 33 (5): 1161–8. DOI: https://doi.org/10.3892/ijmm.2014.1680

22. Ardid-Ruiz A., Ibars M., Mena P., Del Rio D., Muguerza B., Arola L., et al. Resveratrol treatment enhances the cellular response to leptin by increasing OBRb content in palmitate-induced steatotic HepG2 cells. Int J Mol Sci. 2019; 20 (24): 6282. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms20246282

23. Lin H.C., Chen Y.F., Hsu W.H., Yang C.W., Kao C.H., Tsai T.F. Resveratrol helps recovery from fatty liver and protects against hepatocellular carcinoma induced by hepatitis B virus X protein in a mouse model. Cancer Prev Res. (Phila). 2012; 5 (7): 952–62. DOI: https://doi.org/10.1158/1940-6207.CAPR-12-0001

24. Mendes K.L., de Pinho L., Andrade J.M., Paraíso A.F., Lula J.F., Macedo S.M., et al. Distinct metabolic effects of resveratrol on lipogenesis markers in mice adipose tissue treated with high-polyunsaturated fat and high-protein diets. Life Sci. 2016; 153: 66–73. DOI: https://doi.org/10.1016/j.lfs.2016.04.014

25. Volkow N.D., Wang G.J., Baler R.D. Reward, dopamine and the control of food intake: implications for obesity. Trends Cogn Sci. 2011; 15 (1): 37–46. DOI: https://doi.org/10.1016/j.tics.2010.11.001

26. Johansson M., Johansson N., Lund B.O. Xenobiotics and the glucocorticoid receptor: additive antagonistic effects on tyrosine aminotransferase activity in rat hepatoma cells. Basic Clin Pharmacol Toxicol. 2005; 96 (4): 309–15. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1742-7843.2005.pto960406.x

27. Schwager J., Richard N., Widmer F., Raederstor D. Resveratrol distinctively modulates the inflammatory profiles of immune and endothelial cells. BMC Complement Altern Med. 2017; 17 (1): 309. DOI: https://doi.org/10.1186/s12906-017-1823-z

28. Ahmed S.M., Luo L., Namani A., Wang X.J., Tang X. Nrf2 signaling pathway: pivotal roles in inflammation. Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis. 2017; 1863 (2): 585–97. DOI: https://doi.org/10.1016/j.bbadis.2016.11.005

29. Trusov N.V., Shipelin V.A., Mzhelskaya K.V., Shumakova A.A., Timonin A.N., Riger N.A., et al. Effect of resveratrol on behavioral, biochemical and immunological parameters of DBA/2J and tetrahybrid DBCB mice receiving diet with excess fat and fructose. J Nutr Biochem. 2021; 8: 108527. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jnutbio.2020.108527

30. Trusov N.V., Mzhel’skaya K.V., Shipelin V.A., Shumakova A.A., Timonin A.N., Riger N.A., et al. The influence of l-carnitine on the immunological, integral and biochemical parameters of mice receiving a diet with excess of fat and fructose. Rossiyskiy fiziologicheskiy zhurnal imeni I.M. Sechenova [Russian Journal of Physiology named after I.M. Sechenov]. 2019; 105 (5): 619–33. DOI: https://doi.org/10.1134/S0869813919050121 (in Russian)

Молекула межклеточной адгезии 2-го типа

В печени экспрессию ICAM-2 наблюдали в гепатоцитах, антиген был локализован как диффузно в цитоплазме, так и в виде концентрической каймы вдоль плазматической мембраны клеток (рис. 4А-В). В почках основным местом локализации ICAM-2 были эпителиоциты проксимальных почечных канальцев (рис. 4Г-Е). Морфометрический анализ числа ICAM-2⁺-клеток (рис. 2Д, Е) показал, что в печени повышенные уровни экспрессии антигена наблюдались у крыс, получавших ВУВЖР, причем под влиянием РК количество позитивных клеток дозозависимо снижалось в 1,5-2 раза (p<0,05), приближаясь к значениям, характерным для группы СР, т.е. наблюдалась нормализация содержания антигена. В почках крыс, получавших ВУВЖР, но не СР, напротив, введение РК приводило к увеличению числа ICAM-2⁺-клеток в 1,8-2 раза (p<0,05).

Рис. 4. Репрезентативные микрофотографии препаратов органов крыс при иммуногистохимическом окрашивании на молекулах межклеточной адгезии 2-го типа (ICAM-2)

А - печень крысы из 1-й группы (СР); Б - печень крысы из 4-й группы (ВУВЖР); В - 30-изображение печени крысы из 4-й группы (ВУВЖР); Г - почка крысы из 1-й группы (СР); Д - почка крысы из 5-й группы (ВУВЖР + РКн); Е - 30-изображение почки крысы из 2-й группы (СР + РКн).

Fig. 4. Representative micrographs of preparations of rat’s organs stained for intercellular adhesion molecule type 2 (ICAM-2)

A - rat liver from group 1 (B0); B - liver of a rat from group 4 (HFC0); C - 30-image, liver, rat from group 4 (HFC0); 0 - kidney, rat from group 1 (B0); E - kidney, rat from group 5 (HFC0 + RCl); F - 30 image, rat kidney from group 2 (B0 + RCl).

Обсуждение

Согласно полученным данным, у крыс, потреблявших ВУВЖР, повышалась по сравнению с контрольными значениями экспрессия в печени генов Acaca и (на уровне тенденции) Fasn, что вместе с фенотипической картиной ожирения [11] свидетельствует об усилении процессов липогенеза. В проведенном нами ранее исследовании [15] у наследственно тучных крыс Zucker Lepr^fa отмечали по сравнению с животными "дикого типа" аналогичное повышение экспрессии генов Acaca и Fasn, а также липогенных генов Mlxipl (ChREBP) и Ppara, влияние на которые в настоящем исследовании со стороны ВУВЖР не выявлено. Объяснением тому может являться более выраженная дизрегуляция процессов липогенеза в печени наследственно тучных крыс с гиперфагией, вызванной нарушенной рецепцией лептина, по сравнению с животными "дикого типа", потребляющими меньшие количества ВУВЖР, что согласуется с данными работ [15, 16]. С другой стороны, потребление ВУВЖР вызвало у крыс Вистар повышение экспрессии Khk (кетогексокиназа, известная также как фруктокиназа), что совпадает с данными [17], полученными при избытке фруктозы в рационе. Данный фермент, как известно, превращает фруктозу, поступающую с ВУВЖР, во фруктозо-1-фосфат, расщепляемый далее до треуглеродных фрагментов с их включением в процесс липогенеза [18].

В результате потребления модельной БАД РК крысами, находящимися на питании сбалансированным рационом, экспрессия Acaca, Acacb, Fasn, а также Gck статистически значимо увеличивалась, что видимым образом свидетельствует об усилении процессов липогенеза. Эти изменения, однако, никак не соответствовали сдвигам в биохимических показателях этих животных и степени накопления у них жировой ткани, как следует из ранее представленных данных [11]. Отчасти одной из причин этого может быть одновременное возрастание у животных, потреблявших РК, двигательной активности, определяемой по скорости перемещения в лабиринте [11]. Примечательно, что потребление ВУВЖР отменяло эти эффекты, и, более того, изменение в экспрессии Fasn под действием РК меняло свое направление на противоположное, т.е. отмечался рост экспрессии на фоне СР и подавление на фоне ВУВЖР. Этот результат показывает, что до определенной степени гиполипидемический эффект РК у крыс все-таки наблюдается, но только в условиях относительного избытка потребления жира и фруктозы. Выявленные противоречивые эффекты могут быть, предположительно, связаны с взаимодействием Рес и L-Кар, имеющих разные молекулярные мишени воздействия. Согласно данным [19], у мышей с опухолями L-Кар вызывал снижение экспрессии Fasn, но повышал Ppara. В высоких дозах L-Кар, вызывающий повышение уровней ацилкарнитинов в плазме крови, может оказывать провоспалительное действие [20]. Для Рес характерно подавление экспрессии Ppara и Pparg [21], Scd-1 и Fasn [22] в клеточных культурах, а также липогенных генов in vivo [23, 24].

Увеличение количества ТАТ+-клеток в паренхиме печени крыс, получавших ВУВЖР, свидетельствует об усилении метаболизма свободного тирозина, доступного для транспорта в головной мозг, следствием чего может стать снижение синтеза в стриатуме и гипоталамусе дофамина, опосредующего поддержание высокого уровня двигательной активности и энерготрат [25]. По данным [12], повышенное содержание дофамина в межсинаптических пространствах в стриатуме у крыс DATKO с нокаутом гена транспортера дофамина проявляется в снижении анаболических показателей (массы тела, относительной массы печени и абдоминальной жировой ткани). Введение РК в составе ВУВЖР, потребляемого крысами, привело к снижению экспрессии ТАТ, что могло выразиться в возрастании количества синтезируемого дофамина с повышением дофаминергической активности нейронов стриатума, усилением подвижности и энерготрат. При этом следует иметь в виду, что ген, кодирующий ТАТ, находится под контролем глюкокортикоидов [26], уровни которых могут реагировать на применяемые диетические манипуляции органоспецифическим образом.

Способность Рес (но не L-Кар) снижать экспрессию ICAM-2 известна из данных экспериментов на клеточных культурах [27], однако in vivo, как следует из результатов настоящей работы, это воздействие имеет органоспецифическую природу. Повышенная экспрессия ICAM, рассматриваемая как маркер воспаления при ожирении, регулируется факторами NRF-2 сигнального пути [28]. В свете этого согласованное повышение экспрессии ICAM-2 и NRF-2 в почках крыс при высокой дозе РК может рассматриваться как неблагоприятный фактор и согласуется с ранее выявленными нами признаками усиления старения в ткани почек, вызываемого приемом этой БАД [11].

Из представленных данных следует, что при включении комплексной модельной БАД РК в рацион животных ее влияние на гены ферментов липогенеза, во-первых, различается в зависимости от основного рациона. На фоне потребления СР РК вызывает усиление процессов липогенеза, судя по показателям экспрессии Acaca, Acacb и Fasn. Однако при сочетании потребления РК с ВУВЖР это как минимум не наблюдается или даже происходит подавление экспрессии отдельных липогенных факторов, как это видно на примере Fasn. Сходный эффект наблюдается и по количеству TAT+- и ICAM2+-клеток, значимое снижение которых в печени под влиянием РК наблюдается только у животных, получавших ВУВЖР. Во-вторых, указанный эффект РК оказывается органоспецифическим в том смысле, что приобретает противоположную направленность в почечной ткани. Антиадипогенные свойства Рес и L-Кар по отдельности, известные из литературы [1-4] и подтвержденные данными наших недавних исследований [29, 30], при их сочетании в составе РК, по крайней мере, не усиливаются, а в ряде случаев и взаимно нейтрализуются, что может указывать на антагонистическое взаимодействие продуктов экспрессии генов, являющихся мишенями действия обоих БАВ. Это относится в первую очередь к комплексу генов, отвечающих за синтез жирных кислот и развитие жировой ткани.

Заключение

Таким образом, как показало изучение экспрессии генов в печени и почках, совместное введение Рес и L-Кар в рацион крыс, страдающих ожирением, индуцированным потреблением ВУВЖР, в определенных условиях способно оказывать гиполипидемическое действие и проявлять противовоспалительный эффект в печени, а также модулировать ее нейрометаболическую функцию, опосредованную дофаминовыми системами, через регуляцию метаболизма тирозина. Однако, как показывает сравнение с известными данными литературы о гиполипидемическом и противовоспалительном действии входящих в РК компонентов при ожирении, синергического эффекта Рес и L-Кар не наблюдается, а в ткани почек на фоне потребления сбалансированного рациона имеет место даже определенный антагонизм этих компонентов комплексной БАД. Полученные результаты свидетельствуют о возможном взаимодействии Рес и L-Кар на уровне их влияния на экспрессию комплекса генов, отвечающих за процессы обмена липидов и аминокислот, причем характер этого взаимодействия зависит от применяемого основного рациона, а также является органоспецифическим. Детали влияния компонентов РК на генную экспрессию будут предметом дальнейшего транскриптомного исследования. Выявленные в настоящей работе эффекты дают основание предполагать, что применение минорных БАВ в составе комплексных БАД к пище и диетического лечебного питания у пациентов с ожирением и родственными состояниями следует сочетать с коррекцией состава основного рациона питания больных.

Литература

1. Rauf A., Imran M., Suleria H.A.R., Ahmad B., Peters D.G., Mubarak M.S. A comprehensive review of the health perspectives of resveratrol // Food Funct. 2017. Vol. 8, N 12. P. 4284-4305. DOI: https://doi.org/10.1039/c7fo01300k

2. Malaguarnera L. Influence of resveratrol on the immune response // Nutrients. 2019. Vol. 11, N 5. P. 946. DOI: https://doi.org/10.3390/nu11050946

3. Longo N., Frigeni M., Pasquali M. Carnitine transport and fatty acid oxidation // Biochim. Biophys. Acta Mol. Cell. Res. 2016. Vol. 1863, N 10. P. 2422-2435. DOI: https://doi.org/10.1016/j.bbamcr.2016.01.023

4. Panchal S.K., Poudyal H., Ward L.C., Waanders J., Brown L. Modulation of tissue fatty acids by L-carnitine attenuates metabolic syndrome in diet-induced obese rats // Food Funct. 2015. Vol. 6, N 8. P. 2496-2506. DOI: https://doi.org/10.1039/c5fo00480b

5. Wang S., Xu J., Zheng J., Zhang X., Shao J., Zhao L., Hao J. Anti-inflammatory and antioxidant effects of acetyl-l-carnitine on atherosclerotic rats // Med. Sci. Monit. 2020. Vol. 26. Article ID e920250. DOI: https://doi.org/10.12659/MSM.920250

6. Traina G. The neurobiology of acetyl-L-carnitine // Front. Biosci (Landmark Ed). 2016. Vol. 21. P. 1314-1329. DOI: https://doi.org/10.2741/4459

7. Ma S., Feng J., Zhang R., Chen J., Han D., Li X. et al. SIRT1 Activation by resveratrol alleviates cardiac dysfunction via mitochondrial regulation in diabetic cardiomyopathy mice // Oxid. Med. Cell. Longev. 2017. Vol. 2017. Article ID 4602715. DOI: https://doi.org/10.1155/2017/4602715

8. Saqib U., Kelley T.T., Panguluri S.K., Liu D., Savai R., Baig M.S. et al. Polypharmacology or promiscuity? Structural interactions of resveratrol with its bandwagon of targets // Front. Pharmacol. 2018. Vol. 9. P. 1201. DOI: https://doi.org/10.3389/fphar.2018.01201

9. Misawa T., Saitoh T., Kozaki T., Park S., Takahama M., Akira S. Resveratrol inhibits the acetylated-tubulin-mediated assembly of the NLRP3-inflammasome // Int. Immunol. 2015. Vol. 27. P. 425-434. DOI: https://doi.org/10.1093/intimm/dxv018

10. Guide for the care and use of laboratory animals. 8th ed. / Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals; Institute for Laboratory Animal Research (ILAR); Division on Earth and Life Studies (DELS); National Research Council of the national academies. Washington : The National Academies Press, 2011.

11. Шипелин В.А., Шумакова А.А., Семин М.О., Трусов Н.В., Балакина А.С., Тимонин А.Н. и др. Влияние комплекса L-карнитина и ресвератрола на физиологические, биохимические и морфологические показатели крыс в норме и с алиментарным ожирением // Вопросы питания. 2021. Т. 90, № 1. С. 15-32. DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2021-90-1-15-32

12. Apryatin S.A., Shipelin V.A., Trusov N.V., Mzhelskaya K.V., Evstratova V.S., Kirbaeva N.V. et al. Comparative analysis of the influence of a high-fat/high-carbohydrate diet on the level of anxiety and neuromotor and cognitive functions in Wistar and DAT-KO rats // Physiol. Rep. 2019. Vol. 7, N 4. Article ID e13987. DOI: https://doi.org/10.14814/phy2.13987

13. Livak K.J., Schmittgen T.D. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) method // Methods. 2001. Vol. 25, N 4. P. 402-408. DOI: https://doi.org/10.1006/meth.2001.1262

14. Botros M., Sikaris K.A. The De Ritis ratio: the test of time // Clin. Biochem. Rev. 2013. Vol. 34. P. 117-130.

15. Мжельская К.В., Трусов Н.В., Апрятин С.А., Сото С.Х., Гмошинский И.В., Тутельян В.А. Влияние кверцетина на экспрессию генов ферментов углеводного и липидного обмена в печени у крыс с генетически обусловленным и алиментарным ожирением // Вопросы питания. 2019. Т. 88, № 2. С. 6-16. DOI: 10.24411/0042-8833-2019-10012

16. Buqué X., Martínez M.J., Cano A., Miquilena-Colina M.E., García-Monzón C., Aspichueta P. et al. A subset of dysregulated metabolic and survival genes is associated with severity of hepatic steatosis in obese Zucker rats // J. Lipid Res. 2010. Vol. 51, N 3. P. 500-513. DOI: https://doi.org/10.1194/jlr.M001966

17. Vilà L., Rebollo A., Ađalsteisson G.S., Alegret M., Merlos M., Roglans N. et al. Reduction of liver fructokinase expression and improved hepatic inflammation and metabolism in liquid fructose-fed rats after atorvastatin treatment // Toxicol. Appl. Pharmacol. 2011. Vol. 251, N 1. P. 32-40. DOI: https://doi.org/10.1016/j.taap.2010.11.011

18. Rutledge A.C., Khosrow A. Fructose and the metabolic syndrome: pathophysiology and molecular mechanisms // Nutr. Rev. 2007. Vol. 65, N 6. Pt 2. P. S13-S23. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1753-4887.2007.tb00322.x

19. Jiang F., Zhang Z., Zhang Y., Pan X., Yu L., Liu S. L-Carnitine ameliorates cancer cachexia in mice partly via the carnitine palmitoyltransferase-associated PPAR-γ signaling pathway // Oncol. Res. Treat. 2015. Vol. 38, N 10. P. 511-516. DOI: https://doi.org/10.1159/000439550

20. Liu L., Zhang D.M., Wang M.X., Fan C.Y., Zhou F., Wang S.J. et al. The adverse effects of long-term l-carnitine supplementation on liver and kidney function in rats // Hum. Exp. Toxicol. 2015. Vol. 34, N 11. P. 1148-1161. DOI: https://doi.org/10.1177/0960327115571767

21. Dong W., Wang X., Bi S., Pan Z., Liu S. et al. Inhibitory effects of resveratrol on foam cell formation are mediated through monocyte chemotactic protein-1 and lipid metabolism-related proteins // Int. J. Mol. Med. 2014. Vol. 33, N 5. P. 1161-1168. DOI: https://doi.org/10.3892/ijmm.2014.1680

22. Ardid-Ruiz A., Ibars M., Mena P., Del Rio D., Muguerza B., Arola L. et al. Resveratrol treatment enhances the cellular response to leptin by increasing OBRb content in palmitate-induced steatotic HepG2 cells // Int. J. Mol. Sci. 2019. Vol. 20, N 24. P. 6282. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms20246282

23. Lin H.C., Chen Y.F., Hsu W.H., Yang C.W., Kao C.H., Tsai T.F. Resveratrol helps recovery from fatty liver and protects against hepatocellular carcinoma induced by hepatitis B virus X protein in a mouse model // Cancer Prev. Res. (Phila). 2012. Vol. 5, N 7. P. 952-962. DOI: https://doi.org/10.1158/1940-6207.CAPR-12-0001

24. Mendes K.L., de Pinho L., Andrade J.M., Paraíso A.F., Lula J.F., Macedo S.M. et al. Distinct metabolic effects of resveratrol on lipogenesis markers in mice adipose tissue treated with high-polyunsaturated fat and high-protein diets // Life Sci. 2016. Vol. 153. P. 66-73. DOI: https://doi.org/10.1016/j.lfs.2016.04.014

25. Volkow N.D., Wang G.J., Baler R.D. Reward, dopamine and the control of food intake: implications for obesity // Trends Cogn. Sci. 2011. Vol. 15, N 1. P. 37-46. DOI: https://doi.org/10.1016/j.tics.2010.11.001

26. Johansson M., Johansson N., Lund B.O. Xenobiotics and the glucocorticoid receptor: additive antagonistic effects on tyrosine aminotransferase activity in rat hepatoma cells // Basic Clin. Pharmacol. Toxicol. 2005. Vol. 96, N 4. P. 309-315. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1742-7843.2005.pto960406.x

27. Schwager J., Richard N., Widmer F., Raederstor D. Resveratrol distinctively modulates the inflammatory profiles of immune and endothelial cells // BMC Complement. Altern. Med. 2017. Vol. 17, N 1. P. 309. DOI: https://doi.org/10.1186/s12906-017-1823-z

28. Ahmed S.M., Luo L., Namani A., Wang X.J., Tang X. Nrf2 signaling pathway: pivotal roles in inflammation // Biochim. Biophys. Acta Mol. Basis Dis. 2017. Vol. 1863, N 2. P. 585-597. DOI: https://doi.org/10.1016/j.bbadis.2016.11.005

29. Trusov N.V., Shipelin V.A., Mzhelskaya K.V., Shumakova A.A., Timonin A.N., Riger N.A. et al. Effect of resveratrol on behavioral, biochemical and immunological parameters of DBA/2J and tetrahybrid DBCB mice receiving diet with excess fat and fructose // J. Nutr. Biochem. 2021. Vol. 8. Article ID 108527. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jnutbio.2020.108527

30. Трусов Н.В., Мжельская К.В., Шипелин В.А., Шумакова А.А., Тимонин А.Н., Ригер Н.А. и др. Влияние l-карнитина на иммунологические, интегральные и биохимические показатели мышей, получающих рацион с избытком жира и фруктозы // Российский физиологический журнал имени И.М. Сеченова. 2019. Т. 105, № 5. С. 619-633. DOI: https://doi.org/10.1134/S0869813919050121

All articles in our journal are distributed under the CC BY-NC-ND 4.0 (Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International)

© GEOTAR-Media Publishing Group. The use of textual and illustrative content from this publication for the training of any artificial intelligence systems - including machine learning models and neural networks - is strictly prohibited without the prior written consent of the copyright holder.